ВВЕДЕНИЕ
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Химические и физические состав и свойства мочи
1.2 Химические и физические состав и свойства крови
1.3 Органические и неорганические показатели мочи
1.3.1 Основные органические вещества мочи
1.3.2 Основные неорганические компоненты мочи
1.4 Органические и неорганические показатели крови
1.4.1 Основные органические компоненты крови
1.4.2 Основные неорганические компоненты крови
2 ОБЪЕКТ, ПРОГРАММА И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Объект и программа исследований
2.2 Методика исследований
2.2.1 Определение креатинина в моче и крови
2.2.2 Определение содержания мочевой кислоты в сыворотки крови и
моче
2.2.3 Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче
2.2.4 Определение содержания кальция в моче и крови
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Содержание креатинина в биологической жидкости в норме и при
патологии
3.2 Содержание мочевины в биологической жидкости в норме и при
патологии
3.3 Содержание солей кальция в биологической жидкости в норме и при
патологии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
Клиническая лабораторная диагностика – медицинская научная дисциплина, предметом которой является изучение закономерностей взаимосвязей между физиологическим и патологическим состоянием организма, с одной стороны, и изменением состава компонентов его клеток и биологических жидкостей – с другой; разработка методов объективного исследования клеточного и химического состава тканей, биологических жидкостей (клиническая аналитика) и использование сведений, полученных с помощью рекомендованных методов, для выявления отклонений от нормы; установление диагноза, прогноза заболеваний, оценка эффективности проводимого лечения, контроль за осуществлением медикаментозной терапии и профилактики расстройств здоровья.
Клинико-биохимическая лабораторная диагностика включает в себя клиническую химию (клиническую биохимию), клиническую гематологию, общеклинические методы исследования, а также клиническую цитологию, иммунологию, микробиологию, клиническую лабораторную паразитологию и токсикологию.
В настоящее время в крупных, хорошо оснащенных клинико-диагностических лабораториях с помощью биохимических методов исследования выполняется до 75% лабораторных анализов. Преимущественное использование методов клинической химии объясняется, прежде всего, тем, что в основе патогенеза большинства заболеваний лежит вторичное и первичное нарушение обмена веществ.
Благодаря обнаружению врожденных дефектов в процессах метаболизма выделены особые нозологические формы – так называемые «молекулярные болезни». Из более чем 2000 известных наследственных заболеваний около 600 являются ферментопатиями; для некоторой их части точно известен уровень «метаболического блока». Отмечаемое преобладание биохимических исследований над остальными объясняется и тем, что технологические приемы осуществления химического и физико-химического анализа значительно более разнообразны по сравнению с техникой микроскопии. В связи с изложенным клиническая химия рассматривается как один из главных разделов клинико-биохимической лабораторной диагностики.
Основными объектами клинико-химического исследования являются: содержимое сосудов и полостей (кровь, спинномозговая жидкость, транссудаты, экссудаты), выделения человеческого организма, ткани.
В настоящее время наиболее широко используются кровь и моча.
Для того чтобы получить точную информацию, необходимо строго соблюдать правила сбора материала для исследования, условия транспортировки, хранения до момента проведения анализа. Естественно, при этом важны точность измерительной и дозирующей аппаратуры, лабораторной посуды, тщательность выполнения лабораторных процедур.
Актуальность темы: своевременно и правильно выполненные биохимические анализы биологических жидкостей человека позволяют установить отклонения в содержании показателей и, тем самым, предотвратить дальнейшее развитие множества заболеваний или предупредить их.
Целью дипломной работы является изучение содержания неорганических и органических компонентов в биологических жидкостях.
В связи с целью работы были поставлены следующие задачи:
– изучить химические и физические состав и свойства мочи, крови;
– исследовать органические и неорганические показатели мочи и крови;
– определить объект, программу и методику исследований;
– провести исследование и проанализировать результаты.
2 ОБЪЕКТ, ПРОГРАММА И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Объект и программа исследований
Объектом исследований являются пациенты УЗ «Могилёвская городская больница СМП».
Цель исследований – изучить показатели мочевины, мочевой кислоты и креатинина в биохимических анализах мочи и крови, пациентов с почечной недостаточностью, а также содержание солей кальция в моче и крови пациентов с остеопорозом.
Для достижения данной цели программа исследований включает решение следующих задач:
- Выполнить обзор литературы по изучаемой проблеме;
- Изучить методы проведения анализа мочи и крови;
- Сбор экспериментального материала, подготовка образцов, проведение анализа;
- Обработка, систематизация и анализ экспериментальных данных;
2.2 Методика исследований
В наше время существует множество методик определения неорганических и органических компонентов в биологических жидкостях. Мы рассмотрим самые основные и часто встречающиеся из них.
2.2.1 Определение креатинина в моче и крови
Определение содержания креатинина в крови по методу Яффе
Реактивы:
- Раствор трихлоруксусной кислоты, 100(200) г/л
- Насыщенный раствор пикриновой кислоты
- Раствор NaOH, 100 г/л.
- Раствор NaOH, 250 г/л.
- Раствор НСl, 2 моль/л.
- Раствор NaOH, 0,1 моль/л.
- Стандартный раствор креатинина. 20 мг (0,02г) креатинина растворяют в 100 мл дистиллированной воды (в мерной колбе). Этот основной раствор содержит 0,2 мг креатинина в 1 мл. Из него готовят рабочий раствор разведением основного в 20 раз. 1 мл полученного разведения содержит 0,01 мг креатинина. Оба раствора нестойкие, их хранят в стеклянках с притёртой пробкой.
Ход определения. В центрифужную пробирку вносят 1 мл сыворотки, 1 мл дистиллированной воды и 1 мл раствора трихлоруксусной кислоты (разводя тем самым сыворотку в 3 раза). После тщательного перемешивания пробы выдерживают в течение 20 – 25 минут при комнатной температуре. Затем центрифугируют на центрифуге типа ОПН-3 при 3000 об/мин в течение 15 – 20 минут.
В три пробирки для постановки опытной, контрольной и стандартной проб вносят реактивы в объёме, указанном в Таблице 5.
Таблица 5 – Данные для определения
содержания креатинина в крови по методу Яффе
|
Реактивы, мл |
Пробы |
||
|
опытная |
контрольная |
стандартная |
|
|
Центрифугат |
1,0 |
– |
– |
|
Стандартный рабочий раствор креатинина |
– |
– |
1,0 |
|
Раствор пикриновой кислоты |
0,3 |
0,3 |
0,3 |
|
Раствор NaOH (100 г/л) |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
|
Дистиллированная вода |
3,2 |
4,2 |
3,2 |
Содержимое пробирок (вместимостью 10 мл) тщательно перемешивают и через 10 минут колориметрируют на ФЭКе с зелёным светофильтром (500 – 560 нм) в кювете с длиной оптического пути 10 мм относительно контрольной пробы.
Для регистрации результатов определения с успехом могут быть использованы современные биохимические автоматизированные устройства. В этом случае объёмы реагентов могут быть уменьшены в несколько раз.
Расчёт производят по формуле:
Х (мкмоль/л) = (С*Аоп*3*88) / Аст, (1)
где С – концентрация креатинина в рабочем растворе стандарта,
Аоп и Аст – оптическая плотность опытной и стандартной проб,
3– разведение,
88 – коэффициент пересчёта концентрации из мг/100 мл в мкмоль/л.
Определение содержания креатинина в моче по методу Яффе
Реактивы:
- Насыщенный (12 г/л) раствор пикриновой кислоты. Готовится растворением 14 – 15 г кристаллической пикриновой кислоты в 1 л горячей (70 – 80 оС) дистиллированной воды. После фильтрования его хранят в склянке из тёмного стекла. На следующие сутки избыток кислоты отделяется в виде кристаллов. Пользуются прозрачным раствором.
- Раствор NaOH, 100 г/л.
- Раствор NaOH, 125 г/л.
- Стандартный раствор креатинина. 100 мг креатинина растворяют в 100 мл дистиллированной воды (в мерной колбе). 1 мл этого стандартного раствора содержит 1,0 мг креатинина, а 0,25 мл – 0,25 мг.
- Раствор соляной кислоты концентрированной (370 г/л).
